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“猪25羟基维生素d3(25(oh)d3/25 hvd3)ELISA试剂盒”参数说明
| 级别： | PH标准试剂 | 用途： | 实验室 |
| 含量： | Elisa试剂盒 | 应用： | 科学研究 |
| 型号： | Dm-1001270 | 规格： | 96t/48t |
| 商标： | Dm | 包装： | 盒装 |
| 运输过程： | 低温运输 | 产量： | 100000 |
“猪25羟基维生素d3(25(oh)d3/25 hvd3)ELISA试剂盒”详细介绍
上海笃玛生物科技有限公司简单易学但是其操作中有一定的技术要求，在检测过程中除正常反应外，有时常见到一些错误的结果。所以操作时很多细节我们要当心，我司拥有专业团队，帮您解决一系列操作难题。
【产品名称】：猪25羟基维生素d3(25(oh)d3/25 hvd3)ELISA试剂盒
【英文名称】：Pig 25-hydroxy vitamin D3(25 HVD3)ELISA kit
【产品编号】：DM-1001270
【产品规格】：96人份/48人份
【检测方法】：酶联免疫法/酶免法（ELISA）
【产品范围】：人,小大鼠,猪,兔,其它动物细胞因子;细胞凋亡,活性多肽,自身抗体 ,血栓与止血, 骨代谢,肝纤维化,肿瘤,激素内分泌,自身抗体科研ELISA检测试剂盒
【保存条件】：2-8℃
【供 货 期】：现货
猪25羟基维生素d3(25(oh)d3/25 hvd3)ELISA试剂盒实验材料与试剂配制：
1.仪器与材料：酶标仪（使用前预热30分钟），微量加液器、吸头、蒸馏水或去离子水，滤纸。
2. 洗液的配制：按1:30的比例配制洗液备用。
笃玛生物实验操作步骤
1. 标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在第一、第二孔中分别加标准品100μl，然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为240 ng/ml，160 ng/ml ，80 ng/ml，40 ng/ml，20ng/ml）。
2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液50μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7. 温育：操作同3。
8. 洗涤：操作同5。
9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
猪25羟基维生素d3(25(oh)d3/25 hvd3)ELISA试剂盒注意事项：
1． 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2． 浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3． 各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4． 请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6． 底物请避光保存。
7． 严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8． 所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9． 本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。
计算：
以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，
在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD
值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释
倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标
准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值
代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释
倍数，即为样品的实际浓度。
试剂盒性能：
1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.92以上。
2.批内与批见应分别小于9%和15%
保存条件及有效期：
1.试剂盒保存：2-8℃。
2．有效期：6个月
上海笃玛生物科技有限公司猪25羟基维生素d3(25(oh)d3/25 hvd3)ELISA试剂盒可满足于生物化学、分子生物学 、细胞生物学、免疫学等生物实验需求，不用于临床诊断。
